核蛋白提取试剂盒货号：SP35094

您好，欢迎光临武汉赛培生物科技有限公司！本公司产品仅供科研实验研究使用，不用于临床诊断！

客服中心

全国服务热线： 18086415513

人ELISA试剂盒大鼠ELISA试剂盒小鼠ELISA试剂盒鸡ELISA试剂盒鸭ELISA试剂盒羊ELISA试剂盒猪ELISA试剂盒犬ELISA试剂盒猴ELISA试剂盒兔ELISA试剂盒牛ELISA试剂盒鱼ELISA试剂盒植物ELISA试剂盒其他ELISA试剂盒

首页关于我们产品中心实验服务技术文章付款方式联系我们

核蛋白提取试剂盒货号：SP35094

中文名：核蛋白提取试剂盒货号：SP35094

英文名： Nuclear Protein Extraction Kit

储存条件: 见详情

相关信息

别名	细胞核蛋白提取试剂盒
英文名称	Nuclear Protein Extraction Kit
储存条件	附件PMSF-20℃，其它试剂4℃。有效期1年
单位	瓶
规格	50T 100T

产品简介：本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织）。

规格：50T/100T

产品内容：

试剂盒组成	50T	100T
浆蛋白抽提试剂	25ml	50ml
核蛋白抽提试剂	5ml	10ml
PMSF（100mM）	300μl	1ml

保存：核/浆蛋白抽提试剂4℃保存，PMSF于-20 ℃保存。

操作方法：

裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

一、对于体外培养细胞：

1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM。

2．对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用EDTA消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白）。500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。

3．对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。

4．每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀的体积约20μl或40mg）。

5．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。

6．冰浴10分钟。

7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃ 12000～16000g离心10分钟。

8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的PAGE、Western等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。

9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清（避免细胞浆蛋白的污染），加入50-100μl核蛋白抽提试剂。

10．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长）至沉淀完全分散，冰浴10分钟。

11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃12000～16000g离心10分钟。12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。对于组织样品：把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每50mg组织加入200μl-500μl PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5。

注意事项：

1．裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号PC0020)测定蛋白浓度。

2．对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。

3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

title 鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒实验操作步骤 2021/07/05
title 科研实验中ELISA实验过程中的常见问题解答 2021/04/09
title ELISA原理及一步法二步法间接法的区别武汉... 2021/04/28
title 关于ELISA实验二抗标记 2021/04/09

付款方式

本公司发货同时附发票，高校、科研院所等后付款客户请在到货两周内付款，付款可采用转帐或电汇方式, 对于特殊情况可接收现金、支票支付。

在线支付：

支持绝大多数银行借记卡及信用卡，即时到帐，准确快捷，推荐您在支付货款时使用！

支付宝支付：

在线订购后，直接支付宝支付即可。

对公汇款：

武汉赛培生物科技有限公司

开户行：中国建设银行股份有限公司武汉光谷自贸区分行

对公账户：42050111020800000448

电话：027-87639600

质量保证

凡武汉赛培生物销售的产品均有严格的质量保证。本公司所代理进口产品均有原厂家提供的产品检测报告，自产产品都有质控报告，如有需要，您可拨打免费电话向赛培生物总部索取。

质量说明

如发现产品存在包装规格疑问，请于收货之日起七日内向我公司总部或当地办事处提出，并请保证该产品，以备本公司进行核对检验。如果发现有质量问题，请于收货后一月内保留产品50%以上的量，以便本公司回收产品进行质检，确认产品质量。如逾期，则视为已经对本公司产品进行验收。声明：如发生产品索赔事宜，本公司仅在产品价格范围内酌情赔偿，恕不接受超出产品价格范围之赔偿。