赛培新增产品文章:人雌二醇和孕酮 ELISA试剂盒
发布时间:2024-04-09 14:09:25
脂联素对 KGN 细胞雌激素合成和氧化应激的影响
于婷乔1,刘艺芳1,袁庆叶1,石兴宇1,李欣2* (1.北京农业职业学院国际教育学院,北京 102442;2.华大智造科技股份有限公司,深圳 518000) 【摘要】 目的 探讨脂联素(ADP)对人卵巢颗粒细胞系(KGN)雌激素合成、氧化应激和细胞凋亡水平的影响。 方法 以 KGN 为细胞模型,外源添加 ADP或联合毛喉素(FSK)处理24h,同时设置空白对照组,ELISA 方法检测细胞中雌二醇和孕 酮水平,Westernblot方法检测芳香化酶的蛋白表达水平,分析 ADP对 KGN 细胞中雌激素合成的影响;利用氧化应激诱导剂 叔丁基过氧化氢(tBHP)与 ADP联合或单独处理 KGN 细胞,同时设置空白对照组,药物处理24h后,利用 DCFH-DA 法检测 细胞活性氧(ROS)水平,并检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)等氧化应激指标水平,利用 MTT和流式细胞仪检测细胞活力和细胞凋亡,分 析 ADP对tBHP诱导的细胞氧化应激和凋亡的改善作用。 结 果 (1)在 FSK 存在的前提下,细胞经过 ADP处理后,KGN 细胞合成的雌二醇和孕酮水平显著上升(P<0.05)。单独 FSK 处理以及联 合 ADP处理均显著提高 KGN 细胞的芳香化酶表达水平(P<0.05),联合 ADP处理后 KGN 细胞芳香化酶表达水平有进一步 上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)ADP对 抗tBHP诱导的氧化应激的实验结果显示,与 对 照 相 比,添 加tBHP 后 KGN 细胞中 ROS、MDA 水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05)。联合 ADP处理可以显著下调tBHP引 起的 ROS和 MDA 水平的升高(P<0.05),上调SOD活性(P<0.05);单 独 ADP处 理 可 以 上 调 SOD1的蛋白表达水平(P< 0.05)。(3)流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,tBHP处理后,KGN 细胞凋亡水平显著增加(P<0.05),而联合 ADP处 理可以显著缓解tBHP引起的细胞凋亡(P<0.05)。 结论 ADP可能通过影响芳香化酶的表达促进 KGN 细胞中雌二醇和 孕酮的合成;ADP可能通过上调SOD活性,抑制氧化应激,从而缓解tBHP诱导的 KGN 细胞凋亡。 【关键词】 多囊卵巢综合征; 脂联素; 氧化应激; 细胞凋亡 【中图分类号】 R711.75 【文献标识码】 A